El Sistema Fagocítico Mononuclear (SFM) es una población celular muy heterogénea, distribuida en todo el organismo e involucrado en numerosas actividades homeostáticas, inflamatorias e inmunológicas. Estas células poseen un
extensivo rango de fenotipos relacionados con su gran plasticidad funcional. El origen de tal heterogeneidad es parcialmente desconocido. La expresión de antígenos de superficie ha sido utilizada para identificar distintos estados de maduración .
Los macrófagos son las principales células del SFM que participan en los mecanismos de defensa en infecciones con microorganismos de vida endocelular, jugando un rol esencial
en el curso de Brucelosis porcina. El tipo de fagocitosis, la naturaleza del receptor al que se adhiere la brucella y la activación de las células fagocíticas parecerían ser variables críticas. El receptor y la vía utilizada por brucella dentro de la célula huésped podrían ser de gran importancia en su patogenicidad.
El objetivo del presente trabajo es estudiar la expresión de los antígenos CD11b y 2A10 en
células del SFM sanguíneo de porcinos provenientes de una piara infectada naturalmente con B. Suis.
La unidad experimental estaba compuesta por 12 hembras porcinas adultas: 6 seropositivas y 6 seronegativas a las técnicas para el diagnóstico de Brucelosis. Las células del SFM fueron obtenidas por punción aséptica de la vena cava anterior con EDTA. Se colocaron 2,5 ml de sangre en tubos de 50 ml con 47,5 ml de solución de lisis.
Luego de 5´se centrifugaron, se elimino el sobrenadante y se lavó 2 veces con RPMI 1640. Las células se resuspendieron en 1 ml de medio RPMI 1640 suplementado con 10% de suero fetal bovino y 20% de suero porcino seronegativo a las técnicas para el diagnóstico de Brucelosis. Las células de cada muestra fueron contadas en cámara de Neubauer con Azul Tripan y se distribuyeron en 3 tubos Falcon, a una concentración de 5 x 104 células/tubo.
Al primer tubo de cada muestra se le agregó 10 l de Acmo 2F4/11 (contra CD11b), al segundo se agregó 10 l de Acmo 2A10 (contra 2A10) y el tercer tubo se dejo como control. Se incubaron todos los tubos durante 15´a 4ºC, se lavaron con PBS y se les agregó a todos 10 l de conjugado RAM-FITC (DAKO F0313), luego de incubar 15´en las mismas condiciones anteriores se lavaron con PBS y se realizó el análisis mediante citometría de flujo.
Los resultados obtenidos se muestran en la tabla 1
Tabla 1 Expresión de los antígenos utilizados en el estudio
