La enfermedad es causada por una bacteria intracelular denominada Lawsonia intracellularis (
Li),anatomopatológicamente se caracteriza por un marcado engrosamiento de la pared del íleon e histológicamente, por la proliferación de enterocitos inmaduros de las criptas de las vellosidades con disminución o ausencia de células caliciformes (Lawson, 1979).
Con tinciones argénticas (Warthin-Starry) puede evidenciarse la presencia de bacilos. Los mecanismos que inducen a la hiperplasia de las células infectadas por Li se desconocen; Riganti y cols.
(1998) evidenciaron cambios en la expresión de residuos hidrocarbonados en los enterocitos inmaduros.
El Antígeno de proliferación celular nuclear (PCNA) funciona como una proteína auxiliar de la DNA polimerasa. En presencia de la PCNA y un complejo llamado factor C de replicación, la polimerasa inicia la síntesis de DNA y la progresión del ciclo celular, correlacionando su presencia con el estado de proliferación celular.
Con microscopía electrónica se observaron cuerpos
apoptóticos en las células epiteliales sugiriendo que la infección por Li tendría un rol en el proceso de apoptosis de las mismas.
El objetivo de este estudio fue evaluar el grado de expresión del PCNA y antígenos de apoptosis en ileones de cerdos con lesiones hiperplásicas de EPP.
Se analizaron muestras de ileones con lesiones de EPP y controles (C) obtenidas en frigorífico, fijadas en formol y embebidas en parafina. Se realizó recuperación antigénica con
microondas. La detección del PCNA se realizó mediante inmunomarcación por el método de la estreptavidina biotina marcada (LSAB), utilizando como antisuero primario un anticuerpo monoclonal anti-PCNA (clone PC10, Lab. DAKO) y revelación con diaminobencidina. Para el estudio morfométrico se capturaron imágenes de cada uno de los grupos (EPP y C). Se detectó por inmunomarcación in situ fragmentos de DNA apotóticos. Se realizaron estudios estadísticos sobre los resultados obtenidos.
En
las muestras C, a nivel de la base de las criptas se observó reactividad de PCNA moderada en enterocitos siendo paulatinamente menor a medida que se ascendió en la cripta y vellosidad. En las muestras EPP se evidenció intensa marcación del PCNA en los enterocitos hiperplásicos de las criptas; esta reactividad se continuó hasta el borde libre de la vellosidad.
La reactividad del fragmento de DNA en las células epiteliales fue variable pero más acentuada en los controles. El estudio
morfométrico comparativo entre C y EPP arrojó diferencias altamente significativas (p 0,01) del área inmunomarcada entre las vellosidades de ambos grupos (test de Fisher y Tuckey).
La infección por Li
induce a la proliferación de enterocitos inmaduros, con mecanismos enzimáticos inmaduros y con alteraciones en la glicosidación. Se ha postulado que la falta de maduración de los enterocitos puede provocar ausencia de hormonas autócrinas que inhiben fisiológicamente la proliferación (McOrist 1992, 1993).
La marcada expresión de PCNA en las células de las criptas que llegan hasta la vellosidad estaría indicando una alteración en los mecanismos que regulan la proliferación y
recambio epitelial normal. En función de los resultados en la expresión de los antígenos de apoptosis, la infección por Li, no inhibiría este mecanismo, aunque más estudios se deberían realizar para aclararlo. El estudio realizado constituye un aporte para explicar los procesos que alteran el patrón fisiológico de multiplicación de los enterocitos.
Autores: Riganti, J.G.1; Machuca, M.2; Idiart, J.2; Massone, A.2;
Quiroga, A.; Perfumo, C.2, 1 Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Veterinarias, 2 Universidad Nacional de La Plata – Facultad de Ciencias Veterinarias - Instituto de Patología Dr. B Epstein.
Fuente: Universidad Nacional de Rosario - Facultad de Ciencias Veterinarias
